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Catch-Sweep-Fluoreszenzindikator zum kontinuierlichen Monitoring des mikrobiellen Zustands von Tuchspendersystemen

IGF 21939 N

Infolge unsachgemäßer Handhabung kann es zu Keimkontaminationen in Tuchspendersystemen kommen, was unbemerkt zu Kontaminationen der zu desinfizierenden Flächen führen kann.

Der Verbund für Angewandte Hygiene e.V. (VAH) empfiehlt eine routinemäßige Prüfung der Systeme auf Keime mit (kostenintensiven) Kultivierungsverfahren.

Ziel des Forschungsvorhabens ist ein Catch-Sweep-Fluoreszenzindikator zum kontinuierlichen Monitoring des mikrobiellen Zustands von Tuchspendersystemen: Der Nachweis beruht auf der Bindung von Keimen an enzymatisch hydrolysierbaren, auf einer Indikatoroberfläche immobilisierten Ankerfilamenten, die aus einzelsträngiger DNA bestehen und am freien Ende eine Aptamersequenz zur Bindung von Gram-positiven oder -negativen Keimen tragen.

An den Ankerfilamenten sind mehrere enzymatisch nicht hydrolysierbare Peptidnukleinsäuren (PNA)-Aktivatoren gebunden. Ferner sind auf der Indikatoroberfläche PNA-Fluoreszenzreporter immobilisiert. Gebundene vitale Keime sezernieren Nukleasen, welche die Ankerfilamente unter Freisetzung der PNA-Aktivatoren hydrolysieren.

Durch Hydrolyse am Keim gebundener Ankerfilamente unter gleichzeitiger Bindung des Keims an benachbarte intakte Ankerfilamente wird der Keim in einem zufälligen Bewegungsmuster (random walk) über den Indikator transportiert.

Freigesetzte PNA-Aktivatoren aktivieren auf der Transportspur die PNA-Fluoreszenzreporter, so dass bei Anregung mit geeignetem Licht (LED) ein mit bloßem Auge erkennbares Fluoreszenzsignal resultiert.

Das IGF-Pro­jekt 21939 N der For­schungs­ver­ei­ni­gun­g Eu­ro­päi­sche For­schungs­ge­mein­schaft Rei­ni­gungs- und Hy­gie­ne­tech­no­lo­gie e.V., Cam­pus Fich­ten­hain 11, 47807 Kre­feld, wird im Rah­men des Pro­gramms zur För­de­rung der in­dus­tri­el­len Ge­mein­schafts­for­schung und -ent­wick­lung (IGF) vom Bun­des­mi­nis­te­ri­um für Wirt­schaft und Kli­ma­schutz auf­grund eines Be­schlus­ses des Deut­schen Bun­des­ta­ges ge­för­dert.